O desenvolvimento da medula espinhal continua com o aumento na espessura da parede do tubo neural as células se dividem e diferenciam em três camadas concêntricas em torno do lume do tubo estas são: Zona Germinativa, Zona do Manto e Zona Marginal.
- Zona Germinativa: Reveste a luz do tubo com células ependimárias sendo região onde ocorre mitose de precursores neurais e da glia, nela estão prolongamentos de células germinativas.
- Zona do Manto: Onde estão às origens dos neurônios e células da glia com corpos dos neuroblastos associados às células da glia que futuramente esta união originara a substancia cinzenta.
- Zona Marginal: Com prolongamentos dos neuroblastos e com células gliais esta região formara a substancia branca que terá esta coloração devido às bainhas mielinicas dos axônios que são gordurosas.
Obs. Na medula espinhal e oblonga segue-se este padrão. Porém no encéfalo (cérebro e cerebelo) a situação é diferente ,camadas mais profundas perto do lume neuroblastos aglomeram formando núcleos de substancia cinzenta na branca e outros migram para a periferia formando substancia cinzenta no limite externo.
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